Schnellbestimmung von Carboxyhämoglobin in postmortal gewonnenem Blut mittels vollautomatisierter Headspace-Gaschromatographie mit Methanisierung und FID
ABSTRACT:
Es wird die Kombination einer vollautomatischen Headspace-Gaschromatographie mit einem Methanizer und einem Flammenionisationsdetektor (FID) als neue Methode für die Bestimmung von Carboxyhämoglobin (COHb) in postmortalen Blutproben vorgestellt. Ein roboterartiger Autosampler wird für das reproduzierbare Mischen und Thermostatisieren (30 min bei 50°C) wäh-rend der Freisetzung von Kohlenmonoxid (CO) aus COHb eingesetzt. Außer dem Pipettieren der Blutproben und der Freisetzungslösung (Saponin (15 g/l) in 1M Schwefelsäure) werden alle weiteren Schritte vollautomatisch durchgeführt. Nach der Headspace-Injektion und der gaschromato-graphischen Trennung wird das CO unter Wasserstoffzufuhr durch einen Nickelkatalysator zu Methan reduziert. Dieses wird dann mit Hilfe des FID detektiert. Die Berechnung der COHb-Sättigung der Probe erfolgt durch Bildung des Quotienten zu einer 100% CO-gesättigten Blutpro-be:
COHb [%] = Peakfläche (Originalprobe) · 100 / Peakfläche (CO gesättigte Probe)
Die Methode ist präzise, die Variationskoeffizienten liegen bei 1,2 -5,0 % (Intraday) und 3,4 - 11% (Interday). Innerhalb von 2,5 - 100% COHb weist die Methode eine hervorragende Linearität von 0,998 auf. Die Anwendbarkeit der Methode wurde durch die Untersuchung an postmortal entnom-menen Blutproben gezeigt. Die erhaltenen Ergebnisse wurden mit denen der photometrischen Standard-Bestimmung verglichen. Die vorgestellte Methode erweist sich insbesondere als vorteilhaft bei der Untersuchung von Blutproben aus fäulnisverändertem Probenmaterial oder Proben, die durch thermischen Stress verändert wurde.
